素描《自画像》约作于60岁，可能是达·芬奇最后的作品。画面用笔流畅、洗练。从这幅自画像上，我们看到这位巨匠晚年时的思考力、气质以及他那深邃的充满着智慧的目光。他的鼻梁和嘴唇显示着一种坚强不屈的性格与意志力。画家脸上披散着的长发与颌下的长须，其中每一根线条，都给人留下深刻的印象。这使我们感觉到达·芬奇作为一个才智超群的老人的精神状态。从他在这幅画上所展示的技艺来看，他还有无穷的创造力和表现力。
1506年5月，法国人占领米兰，达·芬奇又被占领者法国总督查理·达·安波斯召回米兰，一直到1513年。这7年时间可称为达·芬奇的第二米兰时期。在这个时期，除了《圣母与圣安娜》及其它几幅肖像外，他还为另一位元帅雕塑过一尊骑马像，可惜最终也未能铸成铜像。米兰内部的频繁政乱，对画家的工作多有妨碍。当法国占领军再度被斯福查的后裔武装驱逐出境后，达·芬奇不得不再次离开米兰。1513年，达·芬奇应罗马教皇利奥十世的兄弟朱理安诺·美第奇的召唤，于九月来到罗马。到罗马后发现教皇最宠信的却是当时的大红人拉斐尔，达·芬奇失意之下只得潜心于科学研究。虽经朱理安诺一再请求，教皇仍不给达·芬奇以更多的重视。
画家这时常到医院去解剖尸体。不料，外人造谣诬蔑，说他是巫士，告发他常把小孩尸体的心脏拿去做药；又说他不信上帝，他的邻居从没有见他去教堂忏悔或用圣水洒过房屋。有的还添油加醋，说他一听到做弥撒，全身都会起鸡皮疙瘩。甚至有的危言耸听，说他做了一种有毒的药水，用来折磨皇上……。于是教皇下令禁止他去做剖尸的工作。紧接着他的一个心爱的艺徒自杀了，另一个徒弟也离弃老师而投奔到拉斐尔的身边。少数趋炎附势的人更借此兴风作浪，散布流言，以中伤达·芬奇为快事。这一幅《自画像》，就是在这种恶劣的环境下怀着极其沉重的心情绘制成的。
